本文件規定了核酸靶序列定量方法的性能評估和質量保證的通用要求。本文件適用于數字PCR(dPCR)或實時定量PCR(qPCR)擴增技術對DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)靶序列的定量測定。適用的靶序列核酸分子，包括雙鏈DNA(dsDNA)，如基因組DNA(gDNA)和質粒DNA；單鏈DNA(ssDNA)，互補DNA(cDNA)，單鏈RNA(ssRNA)包括核糖體RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)；雙鏈RNA，包括長鏈和短鏈非編碼RNA［微小RNA(miRNA)和小干擾RNA(siRNA)等］。本文件適用于生物來源的核酸(如病毒、原核細胞和真核細胞)、無細胞生物液體樣本(如血漿或細胞基質)；體外非生物來源的核酸［如寡核苷酸、合成的基因片段和體外轉錄(IVT)的RNA］中提取的核酸。本文件不適用于過短的DNA寡核苷酸(＜50堿基)的定量。本文件包含：--分析設計，包括定量策略(qPCR標準曲線法、dPCR分子計數法、qPCR相對定量法、dPCR比值定量法)和使用控制；--總核酸質量濃度定量和核酸樣本質量控制，包括核酸質量的評估(純度和完整性)；--PCR試驗設計、優化，生物信息學和體外特異性測試；--數據質量控制和分析，包括驗收標準、閾值設置以及歸一化方法；--根據qPCR/dPCR具體要求的方法驗證(精密度、線性、定量限、檢出限、正確度和穩健性)；--計量溯源性建立和測量不確定度評估的方法。本文件不對生物材料的抽樣或生物樣本的處理過程(如采集、保存、運輸、儲存、處理和核酸提取)提出要求或驗收標準。也不對特殊應用(如可能出現特殊基質問題的食品或者臨床應用領域)提出要求和驗收標準。